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膜电位荧光探针DiSBAC2(5) 货号21415

价 格
¥ 1836.0
起订量
≥25mg
可售量
25mg

产品分类

CLASSIFICATION

级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
产品规格 :
25mg
特色服务 :
免费技术咨询 顺丰包邮

产品详情

Product details

膜电位荧光探针DiSBAC2(5)

货号21415存储条件               f/l
规格                          25 mg                   价格1836                       
Ex (nm)636Em (nm)655
分子量462.59溶剂DMSO
产品详细介绍



简要概述

        膜电位荧光探针DiSBAC2(5)是美国AAT Bioquest生产的用于膜电位检测的荧光探针,DiSBAC2(5)是一种灵敏的慢响应膜电位探针,广泛用于测量许多生物系统的膜电位。通常,慢反应探针显示其跨膜分布的潜在依赖性变化,伴随荧光变化。它们的光学响应的幅度远大于快速响应探针的幅度(通常每mV的荧光变化为1%)。包括阳离子羰花青,罗丹明和阴离子氧杂菁的慢反应探针适用于检测由呼吸活动,离子通道渗透性,药物结合和其他因素引起的非激发细胞的平均膜电位的变化。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的膜电位荧光探针DiSBAC2(5)。 

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产品说明书

操作步骤

1.准备细胞:

1.1对于贴壁细胞:在生长培养基中将细胞以40,000至80,000个细胞/孔/100μL在96孔板中培养过夜,或对于384孔板以10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

1.2对于非粘附细胞:从培养基中离心细胞,然后将细胞沉淀悬浮于等量的HHBS和MP染料加载溶液(参见下面的步骤2.2),125,000至250,000细胞/孔/100μL,96-以及聚赖氨酸d板或30,000至60,000个细胞/孔/25μL的用于384孔聚赖氨酸d板。在实验之前,在制动器关闭的情况下以800rpm 离心板2分钟。

注意:每个细胞系应在个人基础上进行评估,以确定最佳的细胞密度为细胞内钙动员。

 

2.准备DiSBAC2(3)染料加载溶液(1板):

2.1在高质量无水DMSO中制备10至30 mM的DiSBAC2(3)原液。应及时使用原液; 任何剩余的溶液需要被等分并冷冻在< -20 ö C.

注意:避免反复冻融循环,避免光照。

2.2制备2X DiSBAC2(3)染料加载 溶液: 在实验当天,将DiSBAC2(3) 固体溶解在DMSO中或将等分试样的DiSBAC2(3)储备溶液解冻至室温。用0.04%的制备的在Hanks(HHBS)20至40μM和20mM Hepes缓冲液或者缓冲您的选择,pH为7的2X工作溶液到0.08%的Pluronic ® F-127(目录#20053)和2mM 锥虫红Plus(Cat#2456)。通过votexing很好地混合它们。该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

 

3.运行膜电位测定:

3.1将100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)DiSBAC2(3)染料加载溶液(来自步骤2.2)加入细胞板中。

注1:如果您的筛选化合物干扰g rowth培养基和血清因子,在添加DiSBAC2(3)染料加载 溶液之前,用等体积的HHBS缓冲液替换生长培养基。或者,细胞可以在无血清条件下生长。

注2:染料加载后不要洗涤细胞。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育30至60分钟。

注意:在病例中,在室温下孵育30至60分钟可能会更好。

3.3使用HHBS或所需的缓冲液制备复合板。 

3.4通过监测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度(Cat#21414)进行膜电位测定。

注意:在实验之前运行信号测试很重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大仪器强度计数的10%至15%的水平。例如,FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000,因此应调整仪器设置以使其信号测试强度在7,000到10,000左右。 


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