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人载脂蛋白A1ApoE试剂盒针对ELISAPro自动ELISA处理进行了优化 货号V101025

价 格
¥ 11400.0
起订量
≥96Tests
可售量
96Tests

产品分类

CLASSIFICATION

级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
产品规格 :
96 Tests
特色服务 :
免费技术咨询 顺丰包邮

产品详情

Product details

Amplite™人载脂蛋白A1(ApoE)试剂盒*针对ELISAPro自动ELISA处理进行了优化*

货号V101025存储条件                   r/l
规格                      96 Tests                     价格11400                 
Ex (nm)
Em (nm)
分子量
溶剂
产品详细介绍


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               02968064558

简要概述

Mabtech的经过仔细验证的ELISAPRO试剂盒提供了所有必需的试剂,以方便,可靠,特异的方式方便地定量测定血清,血浆和细胞培养上清液中的分析物。

ELISA测定原理

ELISAPRO试剂盒随附有预先涂有单克隆抗体(mAb)。样品中的分析物被包被的mAb捕获,并被生物素化的检测mAb和链霉亲和素-HRP(SA-HRP)检测。

血清和血浆样品分析

ELISAPRO试剂盒包括Apo ELISA缓冲液,一种可防止假阳性信号的缓冲液。缓冲液可阻止嗜异性抗体交联测定抗体。嗜异性抗体通常存在于人血清/血浆中,也可以存在于其他物种中。缓冲液已使用来自健康人类献血者的血清/血浆样品进行了验证。

所需材料

  1. 酶标仪可在450 nm读取

  2. ELISA平板清洗器;自动或手动(例如,多移液管或喷射瓶)•精密移液管,吸头和量筒

  3. 用于标准和样品稀释的试管

  4. 蒸馏水或去离子水 


安全信息

Stop溶液0.18 M H2SO4(<1%)对眼睛和皮肤有刺激性,应小心处理。由于不知道暴露的影响,因此应仔细处理该标准。溶液中的缓冲液和试剂含有防腐剂Kathon CG(0.002%),这是一种潜在的过敏原,可能通过皮肤接触引起过敏。人和动物样品应被视为潜在危险的生物材料。所有材料应按照当地法规进行处理。有关更多信息,请查阅我们网站上的《安全数据表》。

制备

在开始测定之前,让板和测定试剂达到室温(TMB底物除外,最好使用冷底物)。
计划板布局,使其一式两份,包括标准曲线,样品和测定背景对照。每孔的体积不应超过100μl。



产品说明书

样品实验方案

储备溶液配制

1.洗涤缓冲液

将50 ml洗涤缓冲液浓缩液添加到950 ml蒸馏水或去离子水中(足以完成1个板的所有洗涤步骤)。如果在20倍浓缩物中形成了晶体,则将其升至室温并轻轻混合以溶解。

2. Apo ELISA缓冲液

用蒸馏水或去离子水将Apo ELISA缓冲液浓缩液稀释5倍,以制备所需体积的Apo ELISA缓冲液。对于每个板,将30 ml Apo ELISA缓冲液浓缩液添加到120 ml水中。

3.样品

所有样品均应在Apo ELISA缓冲液中稀释至少2倍。除去可见的沉淀物并在聚丙烯管/板中稀释,应在样品之前添加缓冲液。高度溶血和高血脂的样品可能会导致定量结果不准确。含有超出分析标准范围的高水平分析物的样品将需要进一步稀释。避免重复冻融循环,将样品储存在-20°C和更高的温度下会产生假高水平。

4.人血清/血浆稀释指南

根据对空腹健康受试者的反复分析,我们建议稀释系数为200,000X。精确的移液非常重要,在稀释步骤之间更换吸头,并使用新鲜制成的稀释液。指示的数量足以重复。

5. ELISA标准

通过添加1 ml标准重构缓冲液将ELISA标准液重构为4μg/ ml的储液,请勿搅拌。让标准液溶解15分钟,然后涡旋3秒。标准液应等份保存在-20°C下。避免重复冻融循环。

6.编制标准曲线

通过添加200μl标准重构缓冲液,将ELISA标准溶液重构为5μg/ ml的原液。不要搅拌。让标准液溶解20分钟并彻底混合。标准液应等份保存在-20°C下。避免重复冻融循环。

如图所示,稀释标准储备溶液以创建标准曲线。指示的数量足以重复。最后一个样品瓶用作测定背景对照,即应省略标准液。在使用30分钟内准备标准曲线。


工作溶液配制
1.检测抗体
在使用15分钟内,将检测抗体在Apo ELISA缓冲液中稀释至0.5μg/ ml的浓度。对于每个板,在12 ml Apo ELISA缓冲液中稀释6μl检测抗体。

2.链霉亲和素
在使用后的15分钟内,将抗生蛋白链菌素-HRP用抗生蛋白链菌素-HRP稀释剂稀释1000倍。对于每块板,在12 ml的链霉亲和素-HRP稀释液中稀释12μl的链霉亲和素-HRP。
 
操作步骤

  1. 用洗涤缓冲液(300μl/孔)洗涤板5次。最后一次洗涤后,将其倒置并用吸水纸吸水。然后立即进行下一步。

  2. 添加样品(至少稀释2倍),标准液和测定背景对照(100μl/孔)。敲击板混合。用粘性板盖覆盖板,并在室温下孵育2小时。

  3. 如上所述清洗板。

  4. 添加检测抗体(100微升/孔)。盖好板并在室温下孵育1小时。

  5. 如上所述清洗板。

  6. 加入抗生蛋白链菌素-HRP(100μl/孔)。盖好板并在室温下孵育1小时。

  7. 如上所述清洗板。

  8. 添加TMB底物(100微升/孔)。在避开直射光的室温下孵育15分钟。

  9. 如上所述清洗板。

  10. 在15分钟内测量450 nm处的吸光度。如果可能,请使用能够减去570至650 nm参考波长的酶标仪。 


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